RESUMO: O objetivo do presente estudo foi caracterizar (fenotipicamente e genotipicamente) duas cepas de Brucella abortus identificadas como pertencentes ao biovar 4 isolada de bovinos no Brasil. As cepas foram isoladas de bursite cervical de bovinos dos estados do Pará e Rio Grande do Sul, respectivamente. Na identificação fenotípica, os isolados foram positivos na exigência de CO2, produziram H2S, foram resistentes à fucsina básica (20 µg / mL) e sensíveis à tionina (20 µg / mL e 40 µg / mL) e apresentaram antígeno de superfície M, mas o antígeno de superfície A foi ausente. Os isolados foram positivos na PCR para o gene bcsp31 (gênero específico) e na PCR - AMOS, ambos os isolados apresentaram perfil de banda consistente com B. abortus biovar 1, 2 ou 4. Além disso, ambos os isolados também apresentaram padrões de restrição idêntica à cepa de referência quando testada pelo omp2b PCR-RFLP. Na genotipagem usando Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) - MLVA (MLVA16), os isolados apresentaram diferenças em vários loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 e Bruce30); no Multiple Locus Sequence Typing (MLST), os isolados também exibiram diferenças na sequência tipo (ST), amostra 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) e amostra 128/11 ST (22-1-1-8-9-3-1-1-1). A extensa tipagem de cepas de B. abortus isoladas de bovinos no Brasil por diferentes abordagens confirmou a rara ocorrência de B. abortus biovar 4 no país.

ABSTRACT: The aim of the present study was to characterize (phenotypically and genotypically) two strains of Brucella abortus identified as belonging to biovar 4 isolated from cattle in Brazil. The strains were isolated from cervical bursitis from cattle in the states of Pará and Rio Grande do Sul, respectively. In the phenotypic identification, the isolates were positive in CO2 requirement, produced H2S, were resistant to basic fuchsin (20 µg / mL) and sensitive to thionin (20 µg / mL and 40 µg / mL) and presented M surface antigen, but A surface antigen is absent. The isolates were positive in the PCR for the bcsp31 gene (genus-specific) and in the AMOS-enhanced PCR, both isolates showed a band profile consistent with B. abortus biovar 1, 2 or 4. Moreover, both isolates also showed restriction patterns identical to the reference strain when tested by the omp2b PCR-RFLP. In genotyping using Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) Analysis - MLVA (MLVA16), the isolates showed differences in several loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 and Bruce30); by Multiple Locus Sequence Typing (MLST), they also exhibited differences in sequence type (ST), strain 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) and strain 128/11 ST (22-1-1 -8-9-3-1-1-1). The extensive typing of B. abortus strains isolated from cattle in Brazil using different approaches confirmed the occurrence of rare B. abortus biovar 4 in the country.

RESUMO: Validou-se neste trabalho uma técnica de PCR Multiplex (mPCR) para detecção de Brucella spp. em amostras de suspensão bacteriana, como ferramenta complementar no diagnóstico da doença. Esta técnica possibilita a caracterização do agente sem que seja necessária a realização de testes bioquímicos, o que diminui consideravelmente o tempo para o diagnóstico final, além de oferecer mais segurança ao analista ao diminuir o tempo de exposição ao agente infecioso. A validação foi realizada de acordo com o Manual de Testes de Diagnósticos da OIE (2008), seguindo as exigências presentes na norma de qualidade da ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. A mPCR validada neste trabalho identificou as diferentes espécies de Brucella ( Brucella abortus , B. suis , B. ovis e B. melitensis ) em suspensão bacteriana, obtidas a partir de amostras de frigorífico. Além disso, discriminou os biovares (1, 2 e 4; 3b, 5, 6 e 9) de B. abortus , de forma agrupada, e diferenciou cepa vacinal de cepa de campo, sendo esta uma técnica rápida, útil e de menor custo para o auxílio no diagnóstico de brucelose no Brasil.

ABSTRACT: A multiplex PCR technique for detection of Brucella spp. in samples of bacterial suspension was validated as a complementary tool in the diagnosis of the disease. This technique allows the characterization of the agent without performing biochemical tests, which greatly reduces the time for a final diagnosis, and provides more security for the analyst by reducing the time of exposure to microorganisms. The validation was performed in accordance with the Manual of Diagnostic Tests from OIE (2008) and following the requirements present in the ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. The mPCR validated in this study identified the different species of Brucella ( Brucella abortus , B. suis , B. ovis e B. melitensis ) of bacterial suspension obtained from the slaughterhouse samples, as well as distinguished the biovars (1, 2 e 4; 3b, 5, 6 e 9) of B. abortus in grouped form and differentiated the field strains from vaccine strains, as a quick, useful and less expensive technique in diagnosis of brucellosis in Brazil.

Realizou-se estudo de prevalência de sibilância em crianças indígenas Guarani hospitalizadas por infecção respiratória aguda baixa no Sul e Sudeste do Brasil, recrutadas a partir de um sistema de vigilância implantado nas aldeias entre maio de 2007 e junho de 2008. Os dados foram extraídos por revisão dos prontuários hospitalares. Estimaram-se razões de prevalência de sibilância brutas e ajustadas segundo categorias das variáveis exploratórias, por regressão de Poisson com ajuste para variância robusta. A prevalência de sibilância foi de 58,1% (136/234). Permaneceram significativamente associadas à sibilância no modelo final: faixa etária, inversamente associada (0-11 meses: referência; 24-35 meses: 0,63, IC95%: 0,40-0,99); internação no outono (verão: referência; outono: 1,58, IC95%: 1,05-2,40); e sinais clínicos de dispneia (1,41, IC95%: 1,09-1,83), tiragem (1,42, IC95%: 1,16-1,73) e estertor (1,43, IC95%: 1,09-1,87). Os resultados revelam elevada carga de morbidade por sibilância e sugerem o fenótipo de sibilância persistente de início precoce, relacionada à recorrência de infecções respiratórias virais.

Prevalence of wheezing was studied in Guarani indigenous children hospitalized for acute lower respiratory tract infections in Southern and Southeastern Brazil, recruited by a surveillance routine established in villages from May 2007 to June 2008. Data were obtained from hospital records. Crude and adjusted prevalence ratios for wheezing were estimated according to categories of target variables, using Poisson regression with robust variance. Prevalence of wheezing was 58.1% (136/234). Risk factors that remained significantly associated with wheezing in the final model were: age bracket, inversely associated (0-11 months: reference; 24-35 months: 0.63, 95%CI: 0.40-0.99); hospitalization in the autumn (summer: reference; autumn: 1.58, 95%CI: 1.05-2.40); dyspnea (1.41, 95%CI: 1.09-1.83); chest indrawing (1.42, 95%CI: 1.16-1.73); crackles (1.43, 95%CI: 1.09-1.87). The results show a high disease burden related to wheezing and suggest the phenotype of early-onset persistent wheezing related to recurrence of viral respiratory infections.

Se realizó un estudio de la prevalencia de sibilancia en niños indígenas guaraníes hospitalizados por infección respiratoria aguda en el sur y sureste de Brasil, recogidos por el sistema de vigilancia desplegado en poblados indígenas entre mayo de 2007 y junio de 2008. Los datos fueron obtenidos mediante la revisión de los registros hospitalarios. Se estimaran las razones de prevalencia de sibilancia bruta y ajustada, de acuerdo con las categorías de las variables explicativas, utilizando la regresión de Poisson con varianza robusta. La prevalencia de sibilancia fue de un 58,1%. Se mantuvo significativamente asociada con la sibilancia en el modelo final: rango de edad, asociado inversamente (0-11 meses: referencia.; 24-35 meses: 0,63, IC95%: 0,40-0,99); hospitalización en otoño (verano: referencia; otoño: 1,58, IC95%: 1,05-2,40); disnea (1,41, IC95%: 1,09-1,83); tiraje (1,42, IC95%: 1,16-1,73); estertores (1,43, IC95%: 1,09-1,87). Los resultados revelan una alta carga de morbilidad relacionada la sibilancia y sugieren el fenotipo de sibilancia persistente de inicio precoz, relacionada con la recurrencia de infección respiratoria viral.

Realizou-se estudo de prevalência de sibilância em crianças indígenas Guarani hospitalizadas por infecção respiratória aguda baixa no Sul e Sudeste do Brasil, recrutadas a partir de um sistema de vigilância implantado nas aldeias entre maio de 2007 e junho de 2008. Os dados foram extraídos por revisão dos prontuários hospitalares. Estimaram-se razões de prevalência de sibilância brutas e ajustadas segundo categorias das variáveis exploratórias, por regressão de Poisson com ajuste para variância robusta. A prevalência de sibilância foi de 58,1% (136/234). Permaneceram significativamente associadas à sibilância no modelo final: faixa etária, inversamente associada (0-11 meses: referência; 24-35 meses: 0,63, IC95%: 0,40-0,99); internação no outono (verão: referência; outono: 1,58, IC95%: 1,05-2,40); e sinais clínicos de dispneia (1,41, IC95%: 1,09-1,83), tiragem (1,42, IC95%: 1,16-1,73) e estertor (1,43, IC95%: 1,09-1,87). Os resultados revelam elevada carga de morbidade por sibilância e sugerem o fenótipo de sibilância persistente de início precoce, relacionada à recorrência de infecções respiratórias virais.

Prevalence of wheezing was studied in Guarani indigenous children hospitalized for acute lower respiratory tract infections in Southern and Southeastern Brazil, recruited by a surveillance routine established in villages from May 2007 to June 2008. Data were obtained from hospital records. Crude and adjusted prevalence ratios for wheezing were estimated according to categories of target variables, using Poisson regression with robust variance. Prevalence of wheezing was 58.1% (136/234). Risk factors that remained significantly associated with wheezing in the final model were: age bracket, inversely associated (0-11 months: reference; 24-35 months: 0.63, 95%CI: 0.40-0.99); hospitalization in the autumn (summer: reference; autumn: 1.58, 95%CI: 1.05-2.40); dyspnea (1.41, 95%CI: 1.09-1.83); chest indrawing (1.42, 95%CI: 1.16-1.73); crackles (1.43, 95%CI: 1.09-1.87). The results show a high disease burden related to wheezing and suggest the phenotype of early-onset persistent wheezing related to recurrence of viral respiratory infections.

Se realizó un estudio de la prevalencia de sibilancia en niños indígenas guaraníes hospitalizados por infección respiratoria aguda en el sur y sureste de Brasil, recogidos por el sistema de vigilancia desplegado en poblados indígenas entre mayo de 2007 y junio de 2008. Los datos fueron obtenidos mediante la revisión de los registros hospitalarios. Se estimaran las razones de prevalencia de sibilancia bruta y ajustada, de acuerdo con las categorías de las variables explicativas, utilizando la regresión de Poisson con varianza robusta. La prevalencia de sibilancia fue de un 58,1%. Se mantuvo significativamente asociada con la sibilancia en el modelo final: rango de edad, asociado inversamente (0-11 meses: referencia.; 24-35 meses: 0,63, IC95%: 0,40-0,99); hospitalización en otoño (verano: referencia; otoño: 1,58, IC95%: 1,05-2,40); disnea (1,41, IC95%: 1,09-1,83); tiraje (1,42, IC95%: 1,16-1,73); estertores (1,43, IC95%: 1,09-1,87). Los resultados revelan una alta carga de morbilidad relacionada la sibilancia y sugieren el fenotipo de sibilancia persistente de inicio precoz, relacionada con la recurrencia de infección respiratoria viral.